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時間分辨熒光免疫層析定量檢測技術(shù)平臺
定量、高敏、快速不可兼得?看我的!
原理簡介
一、稀土元素發(fā)光特點(diǎn)
1、Stokes位移大
Stokes位移達(dá)200nm,很容易分辨激發(fā)光和發(fā)射光,從而排除激發(fā)光干擾。而普通熒光物質(zhì)熒光光譜的Stokes位移只有幾十納米,激發(fā)光譜和發(fā)射光譜通常有部分重疊,互相干擾嚴(yán)重;
2、衰變時間長
鑭系元素與普通的熒光團(tuán)比較,鑭系元素離子螯合物熒光的衰變時間(decay time)長(10~2000us),為傳統(tǒng)熒光的103~106倍。通過時間分辨,可極大地降低了本底熒光,實(shí)現(xiàn)了高信噪比;
3、激發(fā)光譜寬而發(fā)射光譜窄
鑭系螯合物激發(fā)光光譜較寬,最大激發(fā)波長在300~500nm,可通過增加激發(fā)光能量來提高靈敏度。而發(fā)射光譜帶很窄,甚至不到10nm,可采用只允許發(fā)射熒光通過的濾光片,進(jìn)一步降低本底熒光,狹窄的發(fā)射波段為多次分析成為可能。
二、熒光納米微球
與經(jīng)典的時間分辨熒光免疫分析方法DELFIA法不同,時間分辨熒光免疫層析技術(shù)采用熒光納米微球作為標(biāo)記物,每個微球中可包裹成千上萬個熒光分子,大大提高了標(biāo)記效率,有效的提高了靈敏度;同時納米熒光微球表面修飾有合適密度的羧基,用于與蛋白或抗體的共價偶聯(lián),提高標(biāo)記物的穩(wěn)定性。
三、時間分辨熒光免疫層析(TRFILF)原理
當(dāng)將含有待測抗原(抗體)的樣品滴在加樣區(qū),待測樣品中的抗原(抗體)與結(jié)合墊中的熒光納米微球標(biāo)記的抗體(抗原)結(jié)合并通過毛細(xì)作用向前層析,當(dāng)達(dá)到檢測區(qū)后,與檢測線上固定的抗體(抗原)結(jié)合,形成微粒-抗體-抗原-抗體夾心復(fù)合物并被固定在檢測線上,而多余的熒光微球標(biāo)記物繼續(xù)向前層析,與固定在質(zhì)控線二抗結(jié)合。反應(yīng)結(jié)束后,用紫外光源(340nm)對檢測區(qū)掃描檢測,檢測線和質(zhì)控線上熒光納米微球發(fā)出高強(qiáng)度的熒光(615nm),且衰變時間也較長。利用延緩測量時間,待樣品基質(zhì)中自然發(fā)生的短壽命熒光(1-10ns)全部衰變后,再測量稀土元素的特異性熒光,這樣就可以完全排除特異本底熒光的干擾。通過檢測線和質(zhì)控線熒光強(qiáng)度的強(qiáng)弱及其比值,即可分析出樣品中待測物的濃度。
四、時間分辨熒光免疫層析優(yōu)勢
u 靈敏度高,比金標(biāo)、普通熒光靈敏度高2-3個數(shù)量級;
u 可定量檢測,根據(jù)內(nèi)置的標(biāo)準(zhǔn)曲線,可給出待測物的具體濃度;
u 標(biāo)記物穩(wěn)定,抗干擾強(qiáng),檢測結(jié)果重復(fù)性好;
u 操作簡便,檢測時間短,可用于現(xiàn)場篩查;
u 成本便宜,性價比高;
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一、微測生物的優(yōu)勢
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二、C2C服務(wù)模式
我們所有的開發(fā)過程嚴(yán)格遵循ISO 9001:2008 和ISO13485的指導(dǎo)原則,全程可控,節(jié)點(diǎn)清晰,以客戶的需求為產(chǎn)品的設(shè)計(jì)源頭,注重與客戶的及時溝通,實(shí)現(xiàn)從設(shè)計(jì)概念到產(chǎn)品開發(fā)、工藝設(shè)計(jì)、生產(chǎn)加工、產(chǎn)品商業(yè)化(concept to Commercialization,C2C))的一站式服務(wù)。
三、微測免疫層析技術(shù)平臺的特點(diǎn)
u 微測標(biāo)記示蹤物均采用納米微球包裹技術(shù),每個微球內(nèi)可包裹成千上萬的示蹤物,比普通標(biāo)記技術(shù)靈敏度提高2-3個數(shù)量級,且采用共價連接,穩(wěn)定性更優(yōu)。u 微測與國內(nèi)外的主要儀器供應(yīng)商如德國Qiagen、挪威Skannex、芬蘭Magnasense、中科院光機(jī)所等建立了戰(zhàn)略合作伙伴關(guān)系,可根據(jù)您的需求及用途提供豐富多樣的讀數(shù)儀供應(yīng)商選擇,并為您量身定制儀器的各種參數(shù)和功能,一站式提供從樣機(jī)研發(fā)、儀器試劑匹配到大規(guī)模OEM加工的個性化貼身服務(wù)。
四、產(chǎn)品定制開發(fā)服務(wù)流程